技術(shù)文章
Technical articles
更新時間：2021-01-22
點擊次數(shù)：1758
產(chǎn)品簡介：
在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅S，離心，蛋白質(zhì)-染料復(fù)合物被沉淀下來，將沉淀物加入堿性溶液溶解后，分光光度法檢測560nm處吸光度，計算蛋白含量。Leagene 尿蛋白檢測試劑盒(麗春紅比色法)主要用于定量檢測尿液中蛋白含量，較雙縮脲法靈敏，對白蛋白的敏感性比球蛋白要高。
產(chǎn)品組成：
規(guī)格 名稱 |
100T | 儲存 |
試劑(A): 磺基水楊酸溶液 | 100ml | RT 避光 |
試劑(B): 麗春紅S試劑(10×) | 10ml | RT 避光 |
試劑(C): Alkaline Buffer | 200ml | RT |
試劑(D): 蛋白標準(BSA) | 20mg | RT |
試劑(E): 蛋白標準配制液 | 1.5ml | RT |
使用說明書 | 1份 | |
自備材料：
操作步驟(僅供參考)：
5.半定量實驗：取3～5ml新鮮尿液轉(zhuǎn)移入小試管，滴加磺基水楊酸溶液3～4滴，形成界 面，立即觀察，如有渾濁，提示尿液中含有蛋白質(zhì)，渾濁深淺表示含量多少。?
陰性(-) | 不顯渾濁 |
可疑(±) | 輕微渾濁，隱約可見，含蛋白量約為0.05～0.2g/L |
(+) | 明顯渾濁，無顆粒出現(xiàn)，含蛋白量約為0.3g/L |
(2+) | 稀薄乳樣渾濁，出現(xiàn)顆粒，，含蛋白量約為1g/L |
(3+) | 乳濁，有絮片狀沉淀，含蛋白量約為3g/L |
(4+) | 絮片狀沉淀，含蛋白量＞5g/L |
6.取離心管，根據(jù)上述半定量實驗測得的蛋白濃度按下表要求加入待測樣本和蒸餾水，再加入1ml 1×麗春紅S試劑，混勻。3500g離心10min，將上清緩緩倒出后，倒置于濾紙上數(shù)分鐘，用濾紙條吸附管壁上多余的試劑(勿觸及管低沉淀)。再加入2ml Alkaline Buffer至沉淀中，充分混合使沉淀溶解。
蛋白濃度 | 待測樣本 | 蒸餾水 |
＜1g/L | 100μl | — |
1～3g/L | 50μl(測得值×2) | 50μl |
>3g/L | 10μl(測得值×10) | 90μl |
參考區(qū)間： 46.5±18.1 mg/L
注意事項：
1.蛋白標準(BSA)粉末溶解于蛋白標準配制液后，即獲得蛋白標準原液，該原液中含有防腐劑，不影響后續(xù)檢測，該蛋白標準原液-20℃長期保存。
2.待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中，否者待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致，有可能導(dǎo)致測定不準確。
3.待測樣本蛋白含量＜0.1g/L時，可用1ml樣本加0.1ml麗春紅S試劑(10×)，混勻，余下操作同上。
4.本試劑盒也可以用酶標儀檢測，可檢測1000T以上。
5.本法較為靈敏，較比濁法誤差小，膽紅素＜4mg/L時對結(jié)果無影響，也不受室溫影響。為了加快BCA法測定蛋白濃度的速度可以適當用微波爐加熱，但是切勿過熱。室溫保存。蛋白標準配制成溶液后-20℃凍存。
6.離心沉淀后上清液必須全部去除，但不損失沉淀物，否則可影響比色結(jié)果。為了加快BCA法測定蛋白濃度的速度可以適當用微波爐加熱，但是切勿過熱。室溫保存。蛋白標準配制成溶液后-20℃凍存。
7.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期： 12個月有效。蛋白標準配制成溶液后應(yīng)-20℃凍存。
當前位置：
