豬ELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）的含量。采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），往預(yù)先包被豬1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌，用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃顏色。顏色的深淺和樣品中的豬1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

　　豬ELISA試劑盒靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的，通過洗滌以去除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌的方法有兩個(gè)。

　　一、浸泡式

　　1、吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；

　　2、用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)；

　　3、浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；

　　4、吸干孔內(nèi)液體?？捎盟没蛘婵毡贸槲?，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；

　　5、重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。

　　二、流水沖洗式

　　初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更好。