分光光度法50管/48樣

注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

低密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，與冠心病的發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關，是脂類疾病分類和風險預測的一個重要指標。

測定原理

用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽固醇，利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸，從而把膽固醇酯轉化為FC；進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H₂O₂；再利用過氧化物酶催化H₂O₂氧化4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類化合物；在500nm有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品

離心機，恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制

試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體40mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加15mL試劑四充分溶解。

試劑四：液體20mL×1瓶，4℃保存。

標準品：液體1mL×1支，4℃保存。

樣品處理

取血后3小時內分離血清，將血清樣品與試劑一按照2:1的比例充分混勻，25℃靜置15min，2000g離心15min，上清置于冰上待測。

測定操作表

計算公式

LDL-C含量（mmol/L）= A測定管÷A標準管×C標準管

                     =5×A測定管÷A標準管

C標準管：5mmol/L

注意事項

1. 樣本切勿反復凍融，在取血后12小時內完成測定。

2. 配置好的試劑三4℃保存可半個月。

3. 線性范圍為0.17mmol/L- 4.2mmol/L。