總黃銅的提取和測(cè)定

總黃銅的提取和測(cè)定目的要求

     學(xué)習(xí)黃銅類化合物的測(cè)定原理和方法

總黃銅的提取和測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理

    黃銅類化合物是植物的重要次生代謝產(chǎn)物，也是一些保健品和中藥材的有效成分之一。黃銅類化合物的定量方法常用的有HPLC法和分光光度法。在實(shí)際生產(chǎn)和科研過(guò)程中，對(duì)于黃銅單體的定量常采用HPLC法，而對(duì)總黃銅的測(cè)定，考慮到方法的簡(jiǎn)便、快捷以及可行性，多采用在堿性介質(zhì)中加鋁鹽顯色的分光光度法。在堿性條件下黃銅類化合物與鋁鹽形成配位化合物、在500nm波長(zhǎng)有zui大吸收峰。標(biāo)準(zhǔn)品選用蘆丁。

試劑和器材

1）、試劑

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品

5%NaNO₂；10%Al（NO3）3；5%NaOH；70%乙醇。

2、材料

新鮮銀杏葉

3）、器材

容量瓶10mL（×7），25mL（×1），100mL（×2）；吸管0.2mL（×2），1mL（×2），2mL（×

1. ，5mL（×1）；分光光度計(jì)。

操作方法

1）、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線

    稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品5mg；用70%乙醇溶解，定溶于25mL容量瓶，搖勻，得0.2mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

    吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL，分別置于10mL容量瓶中，加入5%NaNO2 0.4mL，搖勻，放置6min；加入10%Al（NO3）3  0.4mL，搖勻，放置6min；加入5%NaOH4.0mL，搖勻，放置15min。以試劑空白作為參比溶液。用1cm比色皿，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2）、總黃銅的提取

    把新鮮的銀杏葉低溫烘干，使水分小于8%,制成干粉。稱取干粉1.0g，置于100mL容量瓶中，加入70%乙醇30mL，浸泡24h。超聲波提取30min，過(guò)濾用70%乙醇定溶于100mL容量瓶中，得到黃銅提取液，代用。

3）、測(cè)定

    吸取黃銅提取液1.00mL，置于10mL容量瓶中，加入5%NaNO3  0.4mL，搖勻，放置6min；加入10%Al（NO3）3  0.4mL，搖勻，放置6min；加入5%NaOH  4.0mL，再加水至刻度，搖勻，放置15min。以試劑空白作為參比溶液。用1cm比色皿，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算總黃銅含量。

注意事項(xiàng)

     對(duì)于某些熱敏成分的提取，采用超聲波破碎法效果較為理想。由于此過(guò)程是一個(gè)物理過(guò)程，浸提過(guò)程中無(wú)化學(xué)反應(yīng)，被浸提的生物活性物質(zhì)在一定時(shí)間內(nèi)保持不變。